Hur Häll gradientgeler

En gradient gel är en blandning av två koncentrationer av akrylamidgel som hälls på ett sådant sätt för att skapa en mjuk övergång från en hög koncentration av akrylamid vid botten till en tändare koncentration på toppen. De är i allmänhet pumpas in kassetter som sandwich gelén mellan två glasskivor . Gradientgel kassetter används i laboratoriet för att bestämma protein vikter och migrationsegenskapertunga organiska molecules.Things du behöver
Gel kassett
2 - kammar lutning Maker Review Omrörning stå
2 omrörarmagneter
Gradient gel lösning
Ammoniumpersulfat ( APS ) katalog tetrametyletylendiamin ( TEMED ) katalog vatten mättad n- butanol
Visa fler Instruktioner
Uppställning av Apparatus

1

Montera gelkassett enligt tillverkarens instruktioner , se till att botten av kassetten är helt förseglad .
2

Placera lutning maker på en omrörning monter på en högre nivå än den övre delen av kassetten. Placera en omrörare i varje kammare . Stäng alla uttag och placera utloppsröret i toppen av kassetten så att gelen rinner ned i övre mitten av kassetten . Addera 3

Fyll nonoutlet cylinder av gradienten maker med en gellösning blandades för att den lägsta önskade koncentrationen. Öppna kranen mellan de två cylindrarna för att rensa ut eventuella luftbubblor och stäng vattenkranen . Fyll utloppscylindernmed gel -lösning blandas till den högsta önskade koncentrationen .
Hälla Gel
4

Blanda 1 ml APS och 0,1 ml TMED per 100 ml gradientgel i varje cylinder .
5

Öppna vattenkranen mellan cylindrarna . Öppna utloppet till ett flöde som kommer att tömma cylindrarna i 5-8 minuter . Rör om innehållet i utloppscylindernhela tiden tills båda cylindrarna är helt slut .
6

Overlay gelen med vattenmättadn- butanol . Addera