Skillnaden mellan norra & Southern blotting

Biologi är en utmaning för många skäl . Ett av dessa skäl är svårigheten att studera makromolekyler --- molekyler som innehåller hundratals eller tusentals mindre molekylära enheter uppträdda tillsammans. Om bara en eller två av de mindre molekylära enheterna har ändrats ut , makromolekylerna ändra deras egenskaper . Biologer måste på något sätt mäta mycket små förändringar i en mycket stor molekyl. Naturligtvis " stora " betyder inte stor nog att hantera eller se , så biologer behöver speciella verktyg för att göra sådana mätningar . Blotting är en av dessa verktyg. Gelelektrofores

Alla blotting tekniker börjar med gelelektrofores . Gelén är mer eller mindre som en tunn rektangel av gelatin . En liten mängd av ett speciellt beredd biologiska molekyler läggs på gelén i ena änden , då ett elektriskt fält appliceras från ena änden till den andra . De framställda molekylerna är elektriskt laddade, så det elektriska fältet drar dem genom gelén . De rör sig långsamt genom tjock gel tills fältet stängs av. De ljusare molekyler få dras snabbare och gå vidare , de tyngre molekylerna tar längre tid att flytta så att de inte gör det så långt .
Använda Gel

I praktiken flera olika prover lägga ner utspridda längs en ​​kant av gelén. Efter det elektriska fältet appliceras , de olika proverna sprida ut på väg mot den motsatta kanten av gelén. Utbredningen av varje prov som kallas en " lane ". Spåret kommer vanligtvis har några olika band motsvarande molekyler av olika vikter inom varje prov. Det finns flera olika sätt att göra banden synliga. Analysera gelen ger biologer en uppfattning om storleken på de olika molekyler , men för att få mer information , är en annan metod som behövs . Det är där blotting kommer in . Addera Blotting

Blotting är ett sätt att ta de molekyler som har särade i gelén och göra dem tillgängliga för fler analys. På samma sätt läskpapper suger upp lös bläck --- eller gjorde på den tiden då folk använde pennor --- biologisk blotting " suger upp " molekylerna från gelén i ett annat material . Molekylerna hamnar i samma mönster , men nu i ett specialpapper eller plastfolie . Molekylerna blir bunden till arket så att de inte rör sig längre , och sedan kan de blötläggas i en lösning av andra sondmolekyler som ger mer information om molekylerna . Det finns flera olika sätt att göra dessa steg , men principen är densamma för alla.
Södra , Norra och västra blotting

Biologen Edwin Southern var den först med att utveckla en blotting-teknik . Han utvecklade alla detaljer som behövs för att vara säker på att DNA- gelelektrofores kunde korrekt överföras och mätas i läsk material. Metoden är uppkallad efter honom : Southern blotting . Andra forskare listat ut hur man gör samma allmänna teknik arbete för RNA , och --- i typisk lättroad forskare stil --- kallas deras detaljerade metod Northern blotting . Senare blev det förfarande modifierats för att mäta proteiner , och kallades Western blotting . Alla tre teknikerna använder samma principer : . Södra åtgärder DNA , Norra åtgärder RNA , västerländska mäter proteiner Addera