Slå på spektrometer och noll det genom att sätta destillerat vatten i en kyvett och köra det som ett prov . Olika spektrometrar har något olika program eller medel för drift , men varje bör komma med tydliga instruktioner för hur man kalibrerar med en tom prov av destillerat vatten . Köpa 2
Fyll en kyvett med det första provet med känd koncentration. Kör provet för att fastställa absorptionsvärdet . Anteckna provnummer , den redan kända koncentrationen och absorbansen läsning. Till exempel kan Prov 1 har en koncentration på 0,05 mol per liter och en absorbans på 400
3
Fyll en fräsch innerlock med nästa prov och köra den genom spektrometer. Anteckna provnummer , koncentration och absorbans . Till exempel kan prov 2 har en koncentration av 0,5 mol per liter och en absorbans av 4000 . Gör samma sak för det tredje provet . För detta exempel , anta att Prov 3 har en koncentration av 5 mol per liter och en absorbans på 40.000 .
4
Använd Beer - Lambert lag för att beräkna den molära absorptionsförmåga koefficienten för varje prov . Denna ekvation anger att absorbansen är lika med koncentrationen hos lösningen multiplicerad med banlängden ( bredden på innerlock ) multiplicerat med den molära absorptiviteten Koefficient: A = EBC, där e är den molära absorptiviteten koefficient , b är våglängden , c är koncentrationen och A är absorbansen . Multiplicera väglängden i centimeter av koncentrationen, sedan dividera absorbansen med det numret . För detta exempel , anta att innerlock är 1 centimeter bred. För prov 1 , multiplicera en av 0,05 , vilket är lika med 0,05 . Dividera 400 med 0,05 för en molar absorptionsförmåga koefficient på 8,000 .
5
Gör samma beräkning för övriga prover . För prov 2 , multiplicera en av 0,5 för en följd av 0,5 . Dividera 4000 med 0,5 för att ge en molar absorptionsförmåga konstant på 8.000 . Samma beräkning för prov 3 ger också ett resultat av 8.000 . I reala laboratorieförhållanden , kommer varje prov producera en något annorlunda konstant. Spela vardera .
6
Genomsnittlig alla beräknade molära absorptionsförmåga konstanter genom att lägga ihop dem och dela summan med antalet kända prover du sprang . Nu kan du använda den resulte molar absorbans för att uppskatta koncentrationen av okända prover . Addera